Eines der faszinierendsten Geheimnisse dieser Leinwand liegt im Studium der Tiermodelle. Rubens hatte nie lebende Tiger gesehen; er basierte sie auf Tigerfellen aus den Kolonien, die er mit der Anatomie von Löwen "füllte", die er in der Brüsseler Menagerie beobachtet hatte. Diese Hybridisierung erklärt, warum Rubens' Tiger eine Muskulatur haben, die an Atlaslöwen erinnert. Jüngste Röntgenanalysen zeigen zudem, dass er die Position des zentralen Tigers mehrmals änderte, um den Falleffekt zu betonen.
Ein weiteres Mysterium betrifft die Zusammenarbeit in der Werkstatt. Obwohl Rubens die Komposition entwarf und wichtige Gesichter malte, ist erwiesen, dass er Spezialisten aus seinem Umfeld hinzuzog. Bei diesem Auftrag ist die Qualität jedoch so homogen, dass Experten zustimmen, dass Rubens persönlich fast jeden Quadratzentimeter überarbeitet hat. Man kann Pentimenti an den Hufen des weißen Pferdes beobachten, was zeigt, dass er das perfekte dynamische Gleichgewicht suchte.
Die Anekdote über die Tigerin und ihre Jungen ist zentral: Sie stammt direkt aus den Schriften von Plinius dem Älteren. Der Legende nach musste ein Jäger Glaskugeln werfen, um einem Tiger zu entkommen, damit das Tier, wenn es sein eigenes Spiegelbild sah, innehielt, weil es glaubte, sein Junges gefunden zu haben. Rubens ignoriert den Spiegeltrick, um den direkten Kampf zu bevorzugen, behält aber das Motiv des geraubten Jungen bei, ein Symbol mütterlichen Schutzes im 17. Jahrhundert.
Schließlich haben wissenschaftliche Analysen ergeben, dass das Blau des Himmels mit Schmalte realisiert wurde, einem Pigment auf Glasbasis, das mit der Zeit verblasst. Ursprünglich war der Himmel wohl in einem viel tieferen Azurblau gehalten, was einen noch heftigeren Kontrast zu den ockerfarbenen und blutigen Tönen des Gemetzels bot. Die moderne Restaurierung bemüht sich, dieses empfindliche Gleichgewicht zu bewahren, ohne die historische Patina zu verfälschen.